{"id":484,"date":"2008-12-19T17:58:32","date_gmt":"2008-12-19T16:58:32","guid":{"rendered":"http:\/\/besson.damien.free.fr\/?p=484"},"modified":"2008-12-19T17:58:32","modified_gmt":"2008-12-19T16:58:32","slug":"mode-demploi","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.besson-net.info\/blog\/mode-demploi\/","title":{"rendered":"Mode d’emploi"},"content":{"rendered":"

Vous l’aurez remarqu\u00e9, l’activit\u00e9 de ce blog est vraiment limit\u00e9e ces derniers temps. Je vais donc commencer cet article par vous en expliquer les raisons m\u00eame si elles sont \u00e9videntes. Le manque de temps est, en effet, le principal facteur de mon mutisme actuel. Comme chaque ann\u00e9e, les fins de semestres sont tr\u00e8s charg\u00e9es, avec les TP. Je n’ai pourtant pas r\u00e9sist\u00e9 \u00e0 l’envie d’\u00e9crire cet article stupide !<\/p>\n

Rentrons dans le vif du sujet de cet article. Je suis s\u00fbr que comme moi, cette p\u00e9riode de l’ann\u00e9e ne vous est pas tr\u00e8s agr\u00e9able. Bien que No\u00ebl arrive, les jours sont courts, il fait froid et le soleil fait son timide. Je vais donc vous livrer ma technique pour ne pas d\u00e9primer. Pour cela, c’est tr\u00e8s simple, il suffit d’attraper un coup de soleil en plein hiver… Si, si, je vous jure, c’est possible ! Suivez le guide<\/p>\n

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Mode d’emploi pour attraper des coups de soleil en hiver :<\/h3>\n

Premi\u00e8re \u00e9tape, coulez un gel d’agarose<\/a> (1,2%) sur une plaque adapt\u00e9e, en prenant soin d’utiliser des peignes afin de m\u00e9nager des puits dans le gel. R\u00e9alisez ensuite un d\u00e9p\u00f4t d’ADN<\/a> pr\u00e9alablement amplifi\u00e9 par r\u00e9action de polym\u00e9risation en cha\u00eene (PCR)<\/a>. Puis soumettez le gel \u00e0 une \u00e9lectrophor\u00e8se dans un tampon adapt\u00e9 (ici on utilisera du TAE<\/a> 1X). R\u00e9glez la cuve d’\u00e9lectrophor\u00e8se pour que la diff\u00e9rence de potentiel appliqu\u00e9e soit de 135V, pendant une vingtaine de minutes. L’ADN, charg\u00e9 tr\u00e8s n\u00e9gativement \u00e0 cause de ses groupements PO4<\/sub>–<\/sup> devrait migrer vers l’anode. Le maillage du gel implique que les diff\u00e9rents fragments migrent en fonction de leur taille dans le gel.<\/p>\n

Deuxi\u00e8me \u00e9tape, r\u00e9cup\u00e9rez le gel dans lequel l’ADN a migr\u00e9 et trempez le une dizaine de minutes dans le bromure d’\u00e9thidium (BET)<\/a> — ATTENTION le BET est un produit hautement canc\u00e9rig\u00e8ne, utilisez des gants adapt\u00e9s. En effet, le BET est un agent intercalant qui se loge dans la mol\u00e9cule d’ADN. Il peut ensuite \u00eatre visualis\u00e9 sous rayons UV… Et oui, vous commencez probablement \u00e0 voir o\u00f9 je veux en venir !<\/p>\n

Maintenant, le but est de r\u00e9cup\u00e9rer la bande d’ADN que vous venez de faire migrer et qui correspond au fragment que vous avez amplifi\u00e9. Pour cela, placez le gel sur une table UV et… la bande que vous cherchez est color\u00e9e en rose<\/a>. Vous n’avez plus qu’\u00e0 utiliser une pipette<\/a> pour r\u00e9cup\u00e9rer votre bande. ATTENTION, pour que cela soit efficace, faites comme moi, oubliez de descendre vos manches au maximum<\/strong> ! Si vous oubliez de prendre cette pr\u00e9caution, votre exp\u00e9rience a de tr\u00e8s fortes chances de ne pas fonctionner ! Surtout prenez votre temps, la r\u00e9cup\u00e9ration de l’ADN est une \u00e9tape clef, et rendre liquide un gel d’agarose n’est pas chose facile, surtout avec des pipettes qui pr\u00e9l\u00e8vent quelques microlitres. Vous avez quand m\u00eame une chance, les lampes UV de laboratoire sont des lampes tr\u00e8s puissantes et la quantit\u00e9 de rayonnement est bien plus importante que celle que d\u00e9livre les appareils favoris des tanorexiques. Vous pouvez ensuite reprendre une vie normale !<\/p>\n

Si votre exp\u00e9rience s’est bien d\u00e9roul\u00e9e, vous devriez vous r\u00e9veillez le lendemain matin avec une magnifique marque rouge vif sur le bras avec lequel vous avez piqu\u00e9 dans votre gel !<\/p>\n

Voici donc la d\u00e9monstration que l’on peut attraper des coups de soleil au beau milieu de l’hiver, et m\u00eame enferm\u00e9 dans un laboratoire, dans une pi\u00e8ce plong\u00e9e dans l’obscurit\u00e9 ! Elle est pas belle la science ?<\/p><\/blockquote>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

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